පළමුවෙන්ම, සරඹය තෝරා ගැනීමට පෙර, මල නොබැඳෙන වානේ දෙස බලන්න.වානේ ෆ්ලැන්ජ්සැකසීම දුෂ්කර වන්නේ කුමක්ද? දුෂ්කරතාවය සොයා ගැනීම ඉතා නිවැරදිව, ඉතා ඉක්මනින් සරඹ බිට් භාවිතය සොයා ගත හැකිය. දුෂ්කරතා මොනවාද?මල නොබැඳෙන වානේ ෆ්ලැන්ජ්සැකසීම? කෙටි කූරු පිහිය: මල නොබැඳෙන වානේ සැකසුම් චිපය ශක්තිමත් සහ දැඩි, කැපුම් උෂ්ණත්වය ඉතා ඉහළ ය. ශක්තිමත් චිපය ඉදිරිපස පිහිය මතුපිට හරහා ගලා යන විට, බන්ධනය, විලයන වෑල්ඩින් සහ අනෙකුත් ඇලවීමේ සංසිද්ධි වලට පහර දෙන අතර, සැකසුම් කොටස්වල මතුපිට දීප්තියට බලපායි; වැඩ දැඩි කිරීම දැඩි වේ.

පරිභෝජනයේදීවිශාල ෆ්ලැන්ජ්, ක්‍රියාකාරිත්වයට බලපාන සාධක බොහොමයක් තිබේවිශාල ෆ්ලැන්ජ්, පහත දැක්වෙන්නේ පොදු සාධක කිහිපයක් ගැන ය, පළමුවැන්න ඇනීලිං උෂ්ණත්වයයි (ඇනීලිං උෂ්ණත්වය යනු පිළිවෙලින් ප්‍රයිමරයේ සහ සැකිල්ලේ උෂ්ණත්ව පරාමිතියයි, එහිදී ප්‍රයිමරයේ සහ අනුපූරක අනුපිළිවෙලින් සියයට 50 ක් ද්විත්ව නූල් සහිත DNA අණු වල උෂ්ණත්වය වේ.
එය PCR හි විශේෂත්වයට බලපාන වඩාත් වැදගත් සාධකයකි. අභිලාෂය සම්බන්ධයෙන්, ඉලක්කගත අනුපිළිවෙල සමඟ නිවාදැමීම සඳහා ප්‍රයිමරය ප්‍රයෝජනවත් වන බව සහතික කිරීමට ඇනීලිං උෂ්ණත්වය ප්‍රමාණවත් තරම් අඩු වන අතර, පිළිවෙලින් නිශ්චිත නොවන බව අඩු කිරීමට එකට ප්‍රමාණවත් තරම් ඉහළ ය. 55 සිට 70 දක්වා සාධාරණ ඇනීලිං උෂ්ණත්වය සාමාන්‍යයෙන් ප්‍රයිමරයේ Tm ට වඩා 5 අඩු ලෙස සකසා ඇත.