முதலில், துரப்பணத்தைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கு முன், துருப்பிடிக்காத எஃகு பற்றிப் பாருங்கள்.எஃகு விளிம்புசெயலாக்கம் கடினம் என்றால் என்ன? சிரமத்தைக் கண்டுபிடிப்பது மிகவும் துல்லியமாகவும், மிக விரைவாகவும் துளையிடும் பிட்டின் பயன்பாட்டைக் கண்டறிய முடியும். இதில் உள்ள சிரமங்கள் என்ன?துருப்பிடிக்காத எஃகு விளிம்புசெயலாக்கமா? சுருக்கமான குச்சி கத்தி: துருப்பிடிக்காத எஃகு செயலாக்க சிப் வலுவானது மற்றும் கடினமானது, வெட்டும் வெப்பநிலை மிக அதிகமாக உள்ளது. முன் கத்தி மேற்பரப்பு வழியாக வலுவான சிப் பாயும் போது, ​​பிணைப்பு, இணைவு வெல்டிங் மற்றும் பிற ஒட்டும் நிகழ்வுகளைத் தாக்கி, செயலாக்க பாகங்களின் மேற்பரப்பு பிரகாசத்தை பாதிக்கும்; வேலை கடினப்படுத்துதல் கடுமையானது.

நுகர்வில்பெரிய விளிம்புகள், செயல்பாட்டைப் பாதிக்கும் பல காரணிகள் உள்ளனபெரிய விளிம்புகள், பின்வருவனவற்றை நாம் சில பொதுவான காரணிகளாகக் கூறுகிறோம், முதலாவது அனீலிங் வெப்பநிலை (அனீலிங் வெப்பநிலை என்பது முறையே ப்ரைமர் மற்றும் டெம்ப்ளேட்டின் வெப்பநிலை அளவுரு ஆகும், அப்போது ப்ரைமர் மற்றும் நிரப்பு வரிசையின் 50 சதவீதம் இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகளின் வெப்பநிலையாகும்.
இது PCR இன் தனித்துவத்தை பாதிக்கும் மிக முக்கியமான காரணியாகும். லட்சியத்தைப் பொறுத்தவரை, அனீலிங் வெப்பநிலை இலக்கு வரிசையுடன் தணிப்பதற்கு ப்ரைமர் பயனுள்ளதாக இருப்பதை உறுதிசெய்யும் அளவுக்கு குறைவாகவும், முறையே குறிப்பிட்ட தன்மையற்ற தன்மையைக் குறைக்கும் அளவுக்கு அதிகமாகவும் உள்ளது. 55 முதல் 70 வரையிலான நியாயமான அனீலிங் வெப்பநிலை பொதுவாக ப்ரைமரின் Tm ஐ விட 5 குறைவாக அமைக்கப்படுகிறது.