පළමුවෙන්ම, සරඹ බිට් එක තෝරා ගැනීමට පෙර, මල නොබැඳෙන වානේ වල ඇති දුෂ්කරතා දෙස බලන්න.වානේ ෆ්ලැන්ජ්සැකසීම. දුෂ්කරතාවය සොයා ගැනීම ඉතා නිවැරදි විය හැකි අතර, සරඹයේ භාවිතය ඉතා ඉක්මනින් සොයාගත හැකිය. මල නොබැඳෙන වානේ ෆ්ලැන්ජ් සැකසීමේදී ඇති දුෂ්කරතා මොනවාද? ඇලෙන සුළු පිහිය: මල නොබැඳෙන වානේ සැකසුම් චිපයේ තද බව, කැපුම් උෂ්ණත්වය ඉතා ඉහළ ය. ශක්තිමත් චිපය ඉදිරිපස කටර් මතුපිට හරහා ගලා යන විට, එය මැලියම්, විලයන වෑල්ඩින් සහ අනෙකුත් ඇලවුම් සංසිද්ධි සිදුවනු ඇත, එය සැකසූ කොටස්වල පෙනුමේ දීප්තියට බලපායි; වැඩ දැඩි කිරීම දැඩි වේ.

පරිභෝජනයේදීවිශාල ෆ්ලැන්ජ්, බලපාන බොහෝ ක්‍රියාකාරී අංග තිබේවිශාල ෆ්ලැන්ජ්. මෙහිදී අපි පොදු මූලද්‍රව්‍ය කිහිපයක් ගැන කතා කරමු. පළමුවැන්න ඇනීලිං උෂ්ණත්වයයි (ඇනීලිං උෂ්ණත්වය යනු පිළිවෙලින් ප්‍රයිමරයේ සහ සැකිල්ලේ උෂ්ණත්ව පරාමිතියයි, එහිදී ප්‍රයිමරයේ සහ අනුපූරක අනුපිළිවෙලින් 50% ක් ද්විත්ව නූල් සහිත DNA අණු වල උෂ්ණත්වය වේ.

එය PCR හි නිශ්චිතතාවයට බලපාන වැදගත් සාධකයකි. අභිලාෂය සම්බන්ධයෙන්, ඉලක්කගත අනුපිළිවෙල සමඟ ප්‍රයිමරය නිෂ්ක්‍රීය කිරීම සහතික කිරීමට තරම් ඇනීලිං උෂ්ණත්වය අඩු වන අතර නිශ්චිත නොවන වෙන් කිරීම් අඩු කිරීමට තරම් ඉහළ ය. සාධාරණ ඇනීලිං උෂ්ණත්වය 55℃ සිට 70℃ දක්වා පරාසයක පවතී. ඇනීලිං උෂ්ණත්වය සාමාන්‍යයෙන් ප්‍රයිමරයේ Tm ට වඩා 5℃ අඩුවෙන් සකසා ඇත.